瘦肉精是一類動物用藥,有數種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。
目前,檢測瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(GC-MS)、毛細管區帶電泳法(CE)和免疫分析技術(IA)。而我國結合自己的實際情況,2001年農業部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標準選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(GC-MS)。而HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測限為0.05μg/ kg,具有檢測精確度高,假陽性率低的有點,被廣泛使用。
賽分科技結合自身在液相色譜領域深厚的技術基礎,及相關完善的產品線,推出瘦肉精的完整解決方案。
動物組織中鹽酸克倫特羅和萊克多巴胺殘留量的檢測
實驗材料
固相萃取柱:SSDBX, 60 mg/3 mL (SSDBX063)
分析物:鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺
1.提取
稱取(5±0.05)g 動物肝組織樣品于帶蓋的聚四氟乙烯離心管中,加入15 mL乙酸乙酯,再加入3 mL 10.0%碳酸鈉溶液,以10 000 r/min以上的速度勻質60 s,蓋上蓋子以 5000 r/min 的速度離心2 min,吸取上層有機溶劑于離心管中,在 殘渣中再加入10 mL 乙酸乙酯在漩渦混合器上混合1 min。離心后吸取有機溶劑并合并提取液。在收集的有機溶劑中加入5 mL 0.10 mol/mL 的鹽酸溶液,漩渦混合 30 s,以5000 r/min 的速度離心2 min,吸取下層溶液,同樣步驟重復萃取一次,合并兩次萃取液,用 2.5 mol/L NaOH 溶液調節 pH 至5.2。
2.凈化
活化:依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水和5 mL 30 mmol/L 鹽酸潤洗固相萃取柱
上樣:將提取液加入柱中,棄去流出液
淋洗:依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗,淋洗液棄去,并將小柱抽干
洗脫:6 mL 4% 氨化甲醇洗脫,收集洗脫液。
3 測定
4 HPLC分析
色譜柱:Sapphire C18, 5 µm, 100 Å, 4.6×250 mm
流動相:10 mM KH2PO4(pH 3.0) : ACN = 70:30 (v/v)
流速:1.0 mL/min;溫度:室溫;檢測器:UV 220 nm;進樣體積:20 µL
1.萊克多巴胺 2. 克倫特羅