新冠病毒（SARS-CoV-2）逐漸出現(xiàn)更多的變異株，對人們的生命安全帶來威脅，全球范圍內都迫切需要能提供更有效和廣譜保護的疫苗以克制新冠疫情的蔓延。
賽分科技客戶北京大學魏文勝課題組在國際頂尖雜志《Cell》發(fā)表題為《Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants》文章*，文中報道了circRNA疫苗技術平臺，并以此開發(fā)了針對新冠病毒及其系列變異株的cricRNA疫苗，可有效中和Omicron、Delta等變異株。該項研究中采用賽分科技體積排阻色譜SRT SEC-2000制備circRNA，可以得到高純度的環(huán)狀RNA疫苗（circRNARBD-Delta）對多種新冠病毒變異株具有廣譜保護力。
背景介紹
目前，新冠疫情防控不能有絲毫松懈，而疫苗是有效應對病毒傳染的措施。現(xiàn)有新冠病毒疫苗一定程度上可以預防新冠病毒入侵，但效果仍有些差強人意，盡管最近有報道稱，在接受兩劑疫苗接種后，用原疫苗進行額外的接種可以增強防護效果、可以部分提高中和能力，但對于Omicron變異類型的病毒的中和能力比野生型的低4~13倍。這對目前的疫苗療效提出了嚴峻的挑戰(zhàn)，突出了開發(fā)針對這種快速傳播變種的有效疫苗的迫切性。
文章概述
文章報告了一種環(huán)狀RNA（circRNA）疫苗，它通過表達刺突蛋白的三聚體受體結合域（Receptor Binding Domain，RBD），引起有效的中和抗體和T細胞反應，對小鼠和恒河猴對抗SARS-CoV-2提供強有力的保護。且對比于1mΨ修飾的mRNA疫苗，circRNA疫苗能夠產生更多、更持久的抗原，并引起更高比例的中和抗體和明顯的Thl傾斜的免疫反應。其中circRNARBD-Delta對多種新冠病毒變異株具有廣譜保護力，使其成為對抗SARS-CoV-2目前關注的變體（VOCs）的有利選擇。
文章介紹的一種高純度circRNA疫苗制備方法，采用賽分科技SRT SEC-2000（5μm， 2000Å，4.6×300mm）色譜柱富集circRNA樣品，分五段采集（圖1），用凝膠電泳檢測收集樣品（圖2），circRNA實現(xiàn)很好的富集。收集富含circRNA的餾分，然后再進行柱純化（圖3），將純化前后的樣品再次進行凝膠電泳分析（圖4），得到高純度樣品，可用于后續(xù)藥效實驗等操作。
圖1 circRNARBD分析色譜圖
圖2 餾分（圖1）收集凝膠電泳圖
圖3 柱純化圖譜
圖4 柱純化后凝膠電泳圖
賽分科技SEC色譜柱已被證實可以很好地應用在環(huán)狀mRNA項目，本中采用的SRT SEC色譜柱用于制備高純度circRNA具有良好效果，在之前的文獻速遞欄目中，介紹賽分科技客戶蘇州科銳邁德在bioRxiv平臺上發(fā)表了用于癌癥治療的環(huán)狀mRNA應用研究成果，其中介紹使用SRT SEC-1000制備柱用于純化circRNA得到高純度的樣品。
此外，MIT Daniel Anderson教授實驗室發(fā)表在《Molecular Cell》雜志發(fā)表的文章同樣采用賽分科技 SRT SEC-2000這款色譜柱實現(xiàn)circRNA的純化。
[1] Liang Qu, Zongyi Yi, Yong Shen, et. Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants, Cell (2022),doi: https://doi.org/10.1016/j.cell.2022.03.044.
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